PRACTICA #6
CONTEO DE UNIDAD FORMADORA DE COLONIAS
POR DILUCIONES
INTRODUCCION
Cuando se requiere investigar el contenido de
microorganismos viables en un alimento, la técnica comúnmente utilizada es la
cuenta en placa. Esta técnica no pretende detectar a todos los microorganismos
presentes, pero el medio de cultivo, las condiciones de temperatura y la
presencia de oxígeno, permiten seleccionar grupos de bacterias cuya presencia
es importante
en diferentes alimentos; por ejemplo, las bacterias
mesofílicas aerobias,o mesófilos aerobios son un indicador general de la
población que pueden estar presente en una muestra y, por lo tanto, de la
higiene con que ha sidomanejado el producto. Este grupo en particular, se
determina en la mayor parte de los alimentos, pero para algunos productos,
también es importante determinar la presencia de bacterias termofílicas,
psicrofílicas y/o psicrotróficas para predecir la estabilidad del producto bajo
diferentes condiciones de almacenamiento. La técnica básica es la misma, pero
cambian las condiciones de incubación, medios de cultivo y algunos otros
detalles, que se mencionan en la técnica. Si se modifican las condiciones de
incubación o se somete la muestra a algún tratamiento previo, el método puede
aplicarse también a la detección de otros grupos como anaerobios o esporulados,
desde luego, con la adecuada selección de medios de cultivo. (1)
OBJETIVO
Realizar adecuadamente la técnica de cuenta en
placa para la muestra de queso.
Interpretar adecuadamente los resultados de la
cuenta en placa.
FUNDAMENTO
La
técnica se basa
en contar las
“unidades formadoras de
colonias” o UFC presentes en un gramo o mililitro de
muestra. Se considera que cada colonia que desarrolla en
el medio de
cultivo de elección
después de un cierto
tiempo de incubación a
la temperatura adecuada,
proviene de un
microorganismo o de un
agregado de ellos,
de la muestra
bajo estudio; ese
microorganismo o microorganismos son
capaces de formar
la colonia, es
decir una UFC.
Para que las colonias puedan
contarse de manera
confiable, se hacen las
diluciones decimales necesarias de
la muestra, antes
de ponerla en el
medio de
cultivo; la técnica para realizar
este procedimiento se describe en “Preparación y dilución de muestras de
alimentos para su análisis microbiológico”. (1)
MATERIAL
1 mechero bunsen
8 cajas Petri (cultivo
de E.coli)
Gradilla
8 tubos de ensaye
2 pipetas graduadas
PROCEDIMIENTO
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Pesar 1g de queso y diluir con 9 ml de agua destilada en
el primer tubo (10-1)
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Centrifugar
a 1500 rpm durante 10 minutos
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Medir
9 ml de solución salina y depositarlos en 6 tubos de ensaye
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En el
2° tubo 10-2 se deposita un 1ml del primer tubo y
mezclar
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Repetir
el paso anterior hasta llegar a la dilución 10-7
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Depositar
1 mL de la
dilución correspondiente
en cada caja, mediante una pipeta estéril
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Incubar
las placas en posición invertida a 37ºC durante 24horas.
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Resultados
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